花卉种苗脱毒处理技术关键点鳞隔堇属
文章来源：恒辉农业网 | 2022-07-13
花卉种苗脱毒处理技术关键点
热处理脱毒 “ 选取生长健壮、外观无明显病虫害症状、品种特性比较典型的种苗，挖出根系，抖尽宿土，定植于装有灭菌基质的花盆内。植后浇足水，适当遮阴，确保成活。待脱毒种苗成活并长出新叶后，移入人工气候箱… 热处理脱毒 “ 选取生长健壮、外观无明显病虫害症状、品种特性比较典型的种苗，挖出根系，抖尽宿土，定植于装有灭菌基质的花盆内。植后浇足水，适当遮阴，确保成活。待脱毒种苗成活并长出新叶后，移入人工气候箱内，先将温度控制在28℃至30℃，3天至5天后将温度调至38℃±1℃，进行热处理并开始计时。热处理28天后，将种苗移至防虫温室内继续培养，采其新枝扦插或组织培养，育成正常种苗。 把新育成的正常种苗分株系进行病毒检测，淘汰带毒苗。未检测出病毒的其余种苗，一个月后再检测一次，确认无病毒可直接作为原种苗保存和繁殖。 茎尖培养脱毒 “ 对植株进行摘心，促进分枝生长。待分枝长至三四对叶时，采摘下最靠近根基部的分枝。冲洗后，剥去茎干上的叶片，切取一两厘米长的嫩梢。将整理好的脱毒材料用肥皂粉溶液浸泡15分钟后，用自来水流水冲洗一小时，然后转到无菌室内进一步处理。在超净工作台中将冲洗干净的嫩梢用75％的酒精浸渍0.5分钟，然后用5％浓度的次氯酸钠溶液灭菌10分钟，无菌水冲洗3至5遍后备用。 在解剖镜下将材料置于消毒的滤纸片上，用经消毒的手术刀和镊子剥离外层幼叶，切取0.3毫米至0.5毫米直径大小、带一两个叶原基的茎尖组织，接种于经过高温消毒的分化培养基上。需要注意的是，茎尖的上下面不能颠倒。接种好的茎尖应分别编号，置于25℃±2℃、光照强度1500勒克斯至3000勒克斯、每天光照10小时至12小时的条件下培养，两三个月后可分化出新芽。 采用增殖培养基，将分化长出的丛生苗切割成单株转接至培养基上，培养条件与分化培养相同。待单株苗又生丛生苗时，可取样进行病毒检测。带毒无性系整瓶淘汰，无病毒无性系可继续转接增殖。20天至30天转接一次，2至3代后再测一次病毒，确认不带病毒后继续增殖，否则仍需淘汰。 不带毒样品上切取1.5厘米至2厘米的嫩梢接人适宜的生根培养基中。在25℃±2℃和光照1500勒克斯至3000勒克斯条件下，培养15天至20天即可长出新根。将生好根的瓶苗置于强光下，开瓶锻炼两三天。洗净根部黏附的培养基后，栽入泥炭和珍珠岩以1?1比例混合的培养基质中，浇透水，盖上塑料薄膜保湿并遮阴。10天后逐渐通风透光，每周浇一次1/4至1/8MS溶液促进生长。两三个月后可以进行品种特性测试栽培，如无变异可作为原种繁殖和保存。 热处理结合茎尖培养脱毒 先将选取的植物材料进行热处理，剥取热处理过程中长出的新梢顶端0.3毫米至0.5毫米的茎尖进行组织培养，然后分化成丛生苗，经切割转接，于25℃±2℃培养室扩繁培养。对每个芽扩繁而成的组培苗统一编一个号，每个编号经培养成苗后都应取样进行病毒检测，确认不带病毒后方可进一步扩繁，带病毒者则整个编号的苗予以淘汰。 （作者系南京农业大学园艺学院副院长兼花卉所所长）